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选用净信组织研磨仪研磨小鼠皮肤组织高效提取RNA
时间: 2020-08-08 17:34 浏览次数:
在制作小鼠皮肤组织样品的时候,会发现皮肤组织韧性特别高。皮肤富含纤维组织和弹性,要从这类组织有效提取RNA是非常困难的,因此完全研磨这些组织是十分具有挑战性的。传统的

  在制作小鼠皮肤组织样品的时候,会发现皮肤组织韧性特别高。皮肤富含纤维组织和弹性,要从这类组织有效提取RNA是非常困难的,因此完全研磨这些组织是十分具有挑战性的。传统的人工或用手持式匀浆器来研磨不仅费时,研磨后的效果也不尽人意比较差,RNA产量低且令样本发热,那么使用组织研磨仪会有什么不同的效果呢?

  

  大、小鼠皮肤组织提取DNA、RNA是目前各高校实验室的一项难题。温州医科大经过多个品牌试用比较,最终选择上海净信研磨仪来处理小鼠皮肤组织。本次实验对象为小鼠去毛后处理过的皮肤,要求磨细一点,提高RNA的浓度,涉及到RNA提取还需要低温研磨,因为有提取液,所以温度不能太低,否则冻住液体无法研磨,
  
  实验步骤:

  1、准备金属适配器一套,离心管和研磨珠若干。
  2、预冷模块,把金属适配器放到液氮或冰箱中预冷(不用的时候顺手把模块放入-20冰箱,即可省去预冷步骤)
  3、取适量小鼠皮肤组织、研磨珠、提取液一起放入离心管中,每管加三到五颗研磨珠,盖子盖上。
  4、将完成预冷后的金属模块取出,放入研磨仪中固定(适配器底部与轴的卡槽互相卡牢)放平后将离心管分别放入适配器对应孔位,(注意平面配平,对称放样)盖上适配器盖,旋紧螺帽。
  5、设置好参数(根据组织类型以及量微调),开始研磨。
  6、磨好后打开仪器取出离心管,即可进行后续实验。

  

 (皮肤组织装管图)                                                              (研磨效果图)

  
  上图为2-3分钟的研磨效果,已经完全研磨完成。之前所有样品都是人工处理,小鼠皮肤样特别难磨,磨出来效果很差,RNA提不出来,所以选用净信组织研磨仪代替人工处理。效率高,效果好,完美解决了老师的问题。
  
  注意事项:
  1、按照组织的种类和量来选择研磨珠能达到最好的效果,有不清楚的及时问上海净信销售人员。
  2、往金属适配器里放离心管时注意平面配平,保证适配器压盖在水平线上。

  

  上图为实验选用仪器: 全自动样品快速研磨仪 JXFSTPRP-24

  
  JXFSTPRP®系统与目前已有的其它样品制备方法相比,具有通用性广、高效灵活的优点。该系统避免了研磨、匀浆、超声波处理等传统方法的费力、耗时、低效等诸多缺点,可以高效、快速、稳定地裂解并纯化各种类型样品的核酸与蛋白。

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