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低温破碎酵母细胞使用高通量组织研磨仪实验
时间: 2019-04-19 15:32 浏览次数:
条形酵母是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的。将有XXmm的筛子扣入到装有10-20 ml球状酵母的50ml破碎罐的顶部,经过离心破碎变成了2L的条状物。压力是由人工用XXml的

  低温破碎酵母细胞使用高通量组织研磨仪实验;形酵母是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的。将有XXmm的筛子扣入到装有10-20 ml球状酵母的50ml破碎罐的顶部,经过离心破碎变成了2L的条状物。压力是由人工用XXml的自由活塞注射器注入罐内,条状可以在-80C°下被保存。


   使用上海净信Tissuelyser全自动样品快速研磨仪(
高通量样品处理系统)对酵母进行研磨,将不锈钢钢珠和样本分别装入研磨钢罐中,然后放入到用聚苯乙烯盒子盛放的液氮中,当预冷冻过程结束后,时间一分钟左右,或者直到原来沸腾的液体氮恢复平静,将破碎罐从液氮中取出,并要将破碎罐沾有的液体全部清理干净,以避免在破碎过程中发生爆炸。研磨钢罐最好用坩埚钳或大镊子夹取出来,而且通常要带经过冷冻的手套,冻伤以免。

 
   研磨钢罐中酵母量不要太多,否则可能会研磨不充分,留有残渣,一般为研磨钢罐的1/3左右为宜,把刚从液氮中取出的钢罐安装在净信Tissuelyser全自动样本快速研磨仪中,分5次进行研磨,设置频率XXhz,XXs,每次间隔都把研磨罐放入液氮中冷却。


       在每次破碎后都要将破碎罐取下,放入到液氮中进行冷冻,当液氮不在沸腾时,可以将钢罐取出,破碎可以继续进行。


       经过100秒的破碎后,我们通过显微镜观察可以发现95%的酵母已经达到破碎效果,用于下一步的实验过程。剩余的酵母可以储存,备用。


       研磨钢罐和钢珠都可重复利用,破碎罐和破碎球可以用温的乙醇清洗,放到干燥处贮存。


低温破碎酵母细胞使用高通量组织研磨仪实验

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